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为解决组蛋白抗体特异性而生--景杰抗体


  作为蛋白质组学的开拓者和领跑者,景杰生物在高通量蛋白质组学和修饰蛋白质组学领域,稳居国内市场服务商榜首,也是目前唯一能提供各种修饰组学服务的科技服务商。景杰公司为何会同时生产销售抗体呢?

  之前科研人员进行蛋白质乙酰修饰组学研究时,利用其他的商品化泛乙酰化抗体富集多肽,会同时富集大量的巴豆酰化、丙酰化与丁酰化修饰的多肽,某些泛乙酰化抗体富集丙酰化多肽的数量甚至比乙酰化的多肽量还要多。另外,2010年Nature子刊上刊登了一篇关于组蛋白修饰性抗体质量问题的文章(An assessment of histone-modification antibody quality,Nature Structural & Molecular Biology, 2010),作者共测试了200个组蛋白抗体(大部分都是引用文献比较多的抗体),在没有考虑与其他新型修饰交叉的情况下,高达25%的组蛋白抗体特异性不满足质量要求。


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  2007年开始,芝加哥大学赵英明教授陆续发现了8种新型的赖氨酸酰化修饰,分别为:赖氨酸丙酰化(Kpr)、丁酰化(Kbu)、巴豆酰化(Kcr)、琥珀酰化(Ksu)、戊二酰化(Kglu)、丙二酰化(Kmal)、2-羟基异丁酰化(Khib)与3-羟基丁酰化(Kbhb)。这八种新型修饰的结构与乙酰化的结构都高度相似(见下图)。


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  基于这些事实,景杰人意识到,目前商品化的组蛋白抗体均开发于20多年前,必然与发现的新型修饰有或强或弱的交叉反应性,从而影响实验结果的真实性。怀着保障科研质量的赤诚之心,景杰公司决定进行蛋白质泛抗体与组蛋白抗体开发研究。

  与此同时科学家证实,巴豆酰化、琥珀酰化等新型修饰,在基因转录等方面发挥重要的作用,也迫切需要开发各种已证实的组蛋白位点抗体,进一步促进这些修饰的研究。

  组蛋白修饰抗体开发相对于普通蛋白的抗体开发,难度更大。目前,组蛋白修饰性抗体仍然以兔多克隆抗体为主。兔多克隆抗体的开发流程非常成熟,并且修饰位点确定后,可供选择的多肽肽段信息基本也已确定,因此抗体的质量主要取决于开发过程控制与设定标准的高低。为了确保抗体的高特异性,景杰公司主要在如下几方面加强了控制:

多肽质量控制:大多数抗体公司对多肽质量不够重视,只是依赖于多肽公司提供的质检报告。目前,多肽公司非常多,竞争非常激烈,价格质量也是参差不齐。而对于修饰性抗体的开发,只能采用人为加上修饰基团的多肽免疫,因而多肽质量非常关键。不仅仅是多肽纯度,还有修饰基团结构是否正确,修饰基团是否连接在正确的修饰氨基酸上面。因此,景杰公司用于免疫的多肽,全部在国内最大的多肽公司合成,同时对于每一条多肽,都重新进行HPLC纯度测定及对结构进行质谱确认。从源头确保抗体的质量;

开发过程控制:景杰公司开发抗体的出发点就是要开发迄今为止特异性最高的抗体,因此合成多肽时,需要将该位点及临近5个氨基酸的已报道的各种修饰多肽全部合成。依据血清检测结果,纯化时逐步将交叉信号去除。如下图:


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    抗体质量终控制:每个抗体必须两人 dot blot 检测结果一致,修饰性多肽信号/其他修饰多肽信号必须大于10,WB检测需同时检测细胞、组织,药物处理等各种方法验证。

  一开始,大多数客户都只是慕名来购买景杰公司独一无二的巴豆酰化、琥珀酰化等新型修饰的抗体。随着抗体的研究成果逐渐在Nature,Science,Cell,MCP,MP等各种知名学术刊物上发表,景杰抗体得到越来越多的科学家认同。经过数年的努力,从默默无闻的抗体开发公司渐渐的成为国内及国际上知名的蛋白质修饰泛抗体及组蛋白密码抗体供应商。除了各类新型修饰的抗体,乙酰化和甲基化抗体质量也得到越来越多的科学家认同。

  目前,景杰抗体的客户已将使用景杰抗体的研究成果在多个知名学术刊物发表,产品相关引用文献可从国际抗体搜素引擎CiteAb网站上查询(www.citeab.com)。而在琥珀酰化、丙二酰化、巴豆酰化等目前非常热门的新型修饰领域,更是有超过80%的发表文献是由景杰生物参与完成或使用景杰生物的抗体完成。

  买抗体,找景杰,保障抗体特异性, 杜绝交叉反应困扰!


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